Prélèvement sanguin et mesure de la glycémie

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Criblage phytochimique

Afin d’identifier les différentes familles chimiques présentes dans l’extrait Max 622, un criblage phytochimique a été effectué. C’est un test qualitatif et semi quantitatif basé sur des réaction de précipitation et de coloration entre des réactifs spécifiques et les familles chimiques correspondantes (FONG et al., 1997). Suivant l’importance de la réaction observée, les signes suivants ont été utilisés pour quantifier les différentes familles chimiques présentes dans l’extrait.

PARTIE PHARMACOLOGIQUE

Afin d’étudier l’effet de l’extrait Max 622 sur l’hyperglycémie, celle-ci a été provoquée chez la souris en administrant une solution de glucose par voie orale, ou par un régime lipidique (LEMHADRIA et al., 2007).

Animaux d’expérience

Des souris femelles, de race SWISS, âgées de 6 à 7 semaines, et pesant entre 25 à 30 grammes ont été utilisées pour l’expérimentation. Elles ont été élevées à l’animalerie de LPGPC, à la température ambiante, avec une alternance de 12 heures de lumière et de 12 heures d’obscurité. Ces animaux ont été nourris avec de la provende LFL© 1420 et ont eu accès libre à de l’eau. Ils ont été mis à jeun pendant 18 heures avant chaque manipulation.

Préparation et administration des produits

L’extrait Max 622 ainsi que le glucose ont été dissout dans de l’eau distillée, et administrés par voie orale dans un volume de10 ml/kg du poids corporel.

Prélèvement sanguin et mesure de la glycémie

Pour mesurer la glycémie, la veine mandibulaire de la souris a été piquée à l’aide d’une lancette stérilisée. La goutte de sang qui coulait a été recueillie avec une bandelette réactive One Call Plus©, puis le saignement a été arrêté en appuyant sur la veine. Ensuite, la bandelette a été insérée dans le glucomètre et la glycémie s’affichait sur l’écran (Figure 1).
Figure 1. Prélèvement sanguin et mesure de la glycémie.

Étude de l’effet de l’extrait Max 622 sur l’hyperglycémie transitoire

Pour étudier l’effet de l’extrait Max 622 sur l’hyperglycémie temporaire, celle-ci a été provoquée chez la souris en administrant par voie orale 4 g/kg de glucose sous forme de solution aqueuse dans 10 ml/Kg d’eau distillée (JONES et al ., 2015).
Des animaux mis à jeun pendant 16 heures avant l’expérience ont été utilisés. Ils ont été répartis en 5 lots de 3 souris : 1 lot de souris témoin n’ayant reçu aucun traitement, 1 lot de souris hyperglycémique non traité et 3 lots de souris hyperglycémiques traitées avec l’extrait Max 622 à différentes doses.
Dans un premier temps, la glycémie de tous les animaux a été mesurée. Juste après, les souris du lot hyperglycémique ont reçu 10 ml/kg d’eau distillée, tandis que les autres 3 lots hyperglycémiques ont été traités avec l’extrait aux doses de 50, 100, et 200 mg/kg dissout dans 10 ml d’eau distillée.
Trente minutes après l’administration de l’eau distillée et de l’extrait, les souris du lot hyperglycémique ainsi que celles des lots traités avec l’extrait Max 622 ont reçu 4 g/kg de solution de glucose par voie orale dans 10 ml/kg d’eau distillée. Puis, 30, 60 et 90 minutes après l’administration de la solution de glucose, leur glycémie a été mesurée (JONES et al ., 2015).

Étude de l’effet de l’extrait Max 622 sur le poids et l’hyperglycémie chronique

L’hyperglycémie chronique a été provoquée chez les souris en leur donnant une alimentation riche en lipide pendant 21 jours. Elles ont été nourries avec de la provende mélangée avec du saindoux. Chaque souris a reçu 3 grammes de provende (LFL© 1430) mélangés avec 2 grammes de saindoux, par jour, pendant 21 jours. Durant cette période, les souris ont été pesées tous les 3 jours, et leur glycémie a été mesurée. Après 21 jours d’engraissement, le régime hyperlipidique a été arrêté, puis les souris ont été réparties en 4 lots : 1 lot engraissé sans traitement et 3 lots de souris engraissées et traitées avec l’extrait Max 622. Puis un lot témoin contenant des souris n’ayant reçu aucun traitement, a constitué le cinquième lot. Les souris du lot engraissé ont reçu 10 ml/kg d’eau distillée toutes les 24 heures pendant 7 jours, tandis que les souris des 3 lots traités avec l’extrait Max 622 ont reçu l’extrait, une fois par jour, aux doses de 50, 100 et 200 mg/kg dans 10 ml d’eau distillée. Enfin, les animaux du cinquième lot n’ont rien reçu (JONES et al., 2015).

EXPRESSION ET ANALYSE DES RÉSULTATS

Les résultats ont été exprimés sous forme de moyenne plus ou moins écart type réduit (̅± ̅). Les moyennes ont été ensuite comparées entre elles en utilisant le test « t » de Student, et la valeur de P 0,05 a été considérée comme significative.

PARTIE CHIMIQUE

Rendement de l’extraction

Après l’évaporation du filtrat obtenu avec 200 grammes de poudre macérés dans le mélange éthanol-eau (60 : 40), 10 grammes d’extrait Max 622 sec d’aspect pâteux, de couleur marron ont été obtenus. Ceci correspond à un rendement à l’extraction de 5%.

Résultats du criblage phytochimique

Le criblage effectué sur l’extrait Max 622 révèle la présence de tanins, d’alcaloïdes et de composés phénoliques en teneur moyenne. Les stéroïdes et les triterpènes sont présents en faible quantité. Enfin, les anthocyanes, les leucoanthocyanes et les sucres réducteurs sont présents en très faible quantité (Tableau III)

PARTIE PHARMACOLOGIQUE

Effet de l’extrait Max 622 sur la glycémie transitoire

La glycémie de base des souris du lot témoin est égale à 5,50 ± 0,05 mmol/L, et elle reste stable pendant la manipulation. Celle des animaux ayant reçu la solution de glucose augmente et atteint une valeur maximale après 30 minutes qui suivent l’administration de la solution de glucose, puis elle diminue en fonction du temps et de la dose de l’extrait administrée.
Chez les souris du lot hyperglycémique non traité, la valeur maximale de la glycémie est égale à 8,37 ± 0,32 mmol/L, contre 7,83 ± 0,08, 7,00 ± 0,23 et 6,40 ± 0,11mmol/L chez les souris traitées avec l’extrait aux doses 50, 100 et 200 mg/kg. La glycémie des animaux traités avec l’extrait Max 622, à la dose de 200 mg/kg revient à sa valeur normale au bout de 60 minutes (P < 0,05) (figure 2). Ces résultats montrent que l’extrait Max 622 inhibe l’hyperglycémie transitoire provoquée par la solution de glucose concentrée.
2. Effet de l’extrait Max 622 sur le poids et l’hyperglycémie chronique a. Variation du poids des souris pendant le régime hyperlipidique
Pendant les 21 jours de régime enrichi en lipide, le poids des souris augmente. Le poids moyen initial de toutes les souris est égal à 24,1 ± 0,1g. Celui des souris témoins reste stable, tandis que celui des souris ayant reçu le régime d’engraissement augmente à 31,1 ± 0,3 g (P < 0,05) (Figure 3).

Variation de la glycémie des souris pendant le régime hyperlipidique

La glycémie des souris du lot témoin n’ayant reçu aucun traitement reste stable à 4,7 ± 0,03 mmoL/L pendant les 21 jours d’observation. Tandis que celle des animaux ayant reçu le régime hyperlipidique augmente en fonction du temps, à partir du 6ème jour et atteint 8 ± 0,2 mmoL/L après 21 jours (P < 0,05) (Figure 4).

Effet de l’extrait Max 622 sur le poids des souris engraissées

Après 21 jours d’engraissement, le poids des souris augmente jusqu’à 31,1 ± 0,3 g. L’administration de l’extrait Max 622 par voie orale, pendant 6 jours, diminue le poids des souris engraissées. Le poids des souris traitées avec l’extrait Max 622 à la dose de 50 mg/kg diminue jusqu’à 26,4 ± 0,37 g, et celles traitées avec l’extrait aux doses de 100 et 200 mg/kg diminue jusqu’à 22,8 ± 0,28 et 21,3 ± 0,2 g. Le poids des animaux de ces deux derniers lots est inférieur à ceux des animaux témoins et des animaux engraissés qui pèsent respectivement 24,1 ± 0,1g, et 30,23 ± 0,1 g (P < 0,05) (Figure 5)

Table des matières

I. INTRODUCTION
II. MATÉRIELS ET MÉTHODES
A. PARTIE CHIMIQU
1. Préparation de l’extrait
2. Criblage phytochimique
B. PARTIE PHARMACOLOGIQUE
1. Animaux d’expérimentation
2. Préparation et administration des produits
3. Prélèvement sanguin et mesure de la glycémie
4. Étude de l’effet de l’extrait Max 622 sur l’hyperglycémie transitoire
5. Étude de l’effet de l’extrait Max 622 sur le poids et l’hyperglycémie chronique
C. EXPRESSION ET ANALYSE DES RÉSULTATS
III. RÉSULTATS
A. PARTIE CHIMIQUE
1. Rendement de l’extraction
2. Résultats du criblage phytochimique
B. PARTIE PHARMACOLOGIQUE
1. Effet de l’extrait Max 622 sur la glycémie transitoire
2. Effet de l’extrait Max 622 sur le poids et l’hyperglycémie chronique
a. Variation des poids des souris pendant le régime hyperlipidique
b. Variation de la glycémie des souris pendant le régime hyperlipidique
c. Effet de l’extrait Max 622 sur le poids des souris engraissées
d. Effet de l’extrait Max 622 sur la glycémie des souris engraissées
IV. DISCUSSION
V. CONCLUSION
VI. BIBLIOGRAPHIE