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Protocole
L’analyse a été réalisée à l’aide d’un spectromètre de masse à piège à ions linéaire quadripolaire équipé d’une interface de pulvérisation turbo en mode positif utilisant la surveillance de réactions multiples. La quantification a été réalisée sur la base de cinq standards internes étiquetés par un isotope.
Conditions d’analyse
Le flux total d’éluant a été dirigé vers la source de pulvérisation de turbo-ion sans se séparer. La tension de l’aiguille était de 5,5 kV, la température du radiateur de pulvérisation aux ions turbo 375,8°C, le gaz nébuliseur (azote) 379 kPa (55 psi) et le gaz du réchauffeur turbo (azote) 604 psi (414 kPa). Le gaz rideau (azote) a été défini à 10 et la pression des gaz de collision (CAD, azote) dans la cellule de collision a été définie à 2 sur le logiciel de contrôle Sciex. Les valeurs optimales pour l’énergie de collision (EC), le potentiel de dégraissage (PD) et le potentiel d’entrée des cellules (PEC) variaient considérablement entre les composés et ont été optimisées individuellement pour chaque composé. L’optimisation a été effectuée à l’aide de la procédure de méthode d’injection de flux (FIA) du logiciel Analyst. Au cours du processus d’optimisation, plusieurs injections de chaque composé ont été réalisées à une concentration de 1 mg / mL dans un mélange méthanol / eau
(1/1, v / v), et les paramètres ont été modifiés entre les injections. (Gergov et al, 2009).
Electrophorèse capillaire
– spectrométrie de masse à ionisation par électronébulisation Wey & Thormann, (2001) ont dosé la codéine en utilisant l’électrophorèse capillaire (EC) avec empilement d’échantillons amplifiés par champ en présence d’un bouchon d’eau inséré à la pointe du capillaire (FASS).
En utilisant des systèmes modulaires comprenant un petit flux tampon hydrodynamique (siphonage) vers l’extrémité capillaire et comportant une détection par spectrométrie de masse à absorption ou ionisation par électrospray (SM), ils ont démontré que l’insertion d’un bouchon d’eau altère les performances de la colonne de tête FASS ou la rend non fonctionnelle. Une électro-injection en l’absence du bouchon d’eau peut être utilisée à la place et il est démontré qu’elle offre une sensibilité de ng / ml lorsqu’elle est appliquée à des échantillons de faible conductivité. Lors de l’aspiration de l’échantillon dans le capillaire lors de l’électro injection, la contamination du flacon d’échantillon avec le tampon est ainsi largement évitée. Une électro-injection appliquée au piège à ions EC et SM
– SM et SM – SM – SM d’analyse de deux urines diluées, d’extraits urinaires en phase solide et d’extraits liquide – liquide urinaires s’est avérée améliorer considérablement la sensibilité par rapport à l’injection hydrodynamique de ces échantillons. Avec l’électroinjection à partir d’extraits d’urine diluée et d’extraits urinaires en phase solide, la présence d’opioïdes libres et de leurs conjugués d’acide glucuronique peut être confirmée sans équivoque dans les urines recueillies après l’administration d’une dose unique d’opioïdes (testés avec environ 7 mg de codéine et 25 mg). Ainsi, l’EC multi-SEP avec électro-injection directe d’opioïdes provenant d’urines non traitées pourrait devenir une approche simple et rapide pour des tests urinaires sans ambiguïté de l’abus de drogues (Wey & Thormann, 2001).
Méthode voltampérométrique
Ensafi et al., (2013) ont utilisé une méthode voltampérométrique pour doser la codéine dans les urines.
Protocole
Les échantillons d’urine ont été conservés au réfrigérateur (à 4 ° C) immédiatement après la collecte. 10 mL de l’échantillon ont été centrifugés pendant 10 min à 2000 tr / min. Le surnageant a été filtré à l’aide d’un filtre de 0,45 mm et ensuite dilué à quatre reprises avec le tampon phosphate pH 7,0. La solution a été transférée dans la cellule voltamétrique afin d’être analysée sans autre traitement préalable. La méthode des ajouts dosés a été utilisée pour la détermination de la morphine et de la codéine dans les échantillons. Afin de précipiter les protéines dans les échantillons de plasma, 1,0 mL des échantillons ont été traités avec 20 mL d’acide perchlorique (HClO4, 20% v / v). Ensuite, le mélange a été vortex pendant 30 s supplémentaires, puis centrifugé à 6000 tr / min pendant 5 min. La solution a été diluée cinq fois avec de l’eau et transférée dans la cellule voltamétrique afin d’être analysée sans autre traitement préalable.
Dosage de la codéine dans le sang
CLHP couplée à la spectrométrie de masse
Plusieurs méthodes ont été utilisées pour doser la codéine dans le plasma humain. Wu et al., (2013), Hu et al., (2011), Ginman et al., (1985) et Eckart et al., (2015) ont développé des méthodes de chromatographie liquide – spectrométrie de masse en tandem utilisant une ionisation par électrospray en mode d’ionisation positive pour la détection simultanée de multiples opioïdes dans le plasma. Un dosage biologique rapide et sensible basé sur la chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse en tandem (CL-SM / SM) a été mise au point et validée pour le dosage simultané de la codéine et de ses métabolites actifs, y compris la morphine, la morphine 3β-glucuronide (M3G) et la morphine 6β-glucuronide (M6G), dans le plasma humain. La préparation d’échantillons de plasma après l’ajout de naloxone en tant qu’étalon interne (IS) a impliqué une extraction en phase solide (SPE) sur des cartouches C18. Une chromatographie en phase inversée utilisant une élution en gradient avec du méthanol et une solution d’acide formique à 0,04% (pH 3,5) a été utilisée pour la séparation en un temps de traitement de 5 min. Les analytes ont été détectés en mode ion positif en utilisant le suivi de réactions multiples des transitions à m / z 300,4 → 215,2 pour la codéine, 286,2 → 152,0 pour la morphine et 462,2 → 286,2 pour M3G et M6G. La méthode présente les caractéristiques de performance suivantes: un domaine de validité de 0,05 à 80 ng / ml pour la codéine, la M3G et la M6G et de 0,05 à 5,0 ng / ml pour la morphine avec des coefficients de corrélation (r2) supérieurs à 0,997 pour tous les analytes. La limite inférieure de quantification (LLOQ) pour les quatre analytes était de 0,05 ng / ml. La méthode était déclarée fidèle avec un CV <12%. La méthode a été appliquée avec succès à une étude de pharmacocinétique de la codéine chez des volontaires chinois sains mongols après une dose orale de 30 mg (Wu et al., 2013).
Table des matières
INTRODUCTION
PREMIERE PARTIE : Rappels bibliographiques sur la codéine
I. Historique
II. Propriétés physicochimiques
III. Classification
IV. Pharmacologie
IV.1. Mécanisme d’action
IV.2. Pharmacocinétique
IV.2.1. Voie orale
IV.2.2. Autres voies
IV.3. Pharmacodynamie
IV.3.1. Indications thérapeutiques
IV.3.2. Contre-indications
IV.3.3. Effets indésirables
V. Toxicologie
V.1. Toxicité aiguë
V.2. Toxicité chronique
V.3. Traitement
VI. Mésusages
VI.1. Définitions
VI.2. Détournements de la codéine.
DEUXIEME PARTIE : Inventaire des méthodes de dosage de la codéine dans différentes matrices
I. OBJECTIFS
I.1. Objectif général
I.2. Objectifs spécifiques
II. METHODOLOGIE
III. RESULTATS
III.1. Dosage de la codéine dans les matières premières et formes pharmaceutiques.
III.1.1. Dans les matières premières
III.1.1.1. Selon les pharmacopées
III.1.1.2. Autres méthodes
III.1.2. Dans les préparations pharmaceutiques
III.1.2.1. Dans les sirops
III.1.2.2. Dosages dans les comprimés
III.1.2.3. Dosage dans les capsules Selon la pharmacopée américaine
III.1.2.4. Dosage de la codéine dans les suppositoires
III.2. Dosage de la codéine dans les milieux biologiques
III.2.1. Dosage de la codéine dans l’urine
III.2.1.1. Méthodes chromatographiques
III.2.1.2. Spectrométrie de masse
III.2.1.3. Electrophorèse capillaire – spectrométrie de masse à ionisation par électronébulisation
III.2.1.4. Méthode voltampérométrique
III.2.2. Dosage de la codéine dans le sang
III.2.2.1. CLHP couplée à la spectrométrie de masse
III.2.2.2. CLHP avec extraction magnétique en phase solide
III.2.2.3. Electrophorèse capillaire couplée à une détection par chimiluminescence
III.2.3. Méthode immuno-enzymatique.
III.2.4. Dosage de la codéine dans la sueur.
III.2.5. Dosage de la codéine dans les cheveux.
III.2.5.1. Chromatographie en phase gazeuse couplée à la spectrométrie de masse
III.2.5.2. CLHP couplée à la spectrométrie de masse
III.2.5.3. Méthode immuno-enzymatique : tests ELISA One-StepTM
III.2.5.4. Méthode radio immunologique
COMMENTAIRES
CONCLUSION
