INCUBATION ET OBSERVATION DES SYMPTÔMES

INCUBATION ET OBSERVATION DES SYMPTÔMES

La souche a été multipliée sur une variété de courgette nommée Précoce Maraîchère. Des feuilles virosées provenant des pots de multiplication sont broyées dans un mortier avec une solution de broyage à raison de quatre (4) ml par gramme de feuilles. La solution de broyage est obtenue en mélangeant 1,075 g de phosphate disodique (Na2HPO4, 12H2O) avec 0,2 g de diethylthiocarbamate (DIECA) ajusté à 100 ml par addition d’eau distillée. Du charbon actif (0,5 g) a été ajouté pour limiter les inhibiteurs d’infection de la plante de même qu’un d‟abrasif (0,4 g), le carborundum pour créer des microlésions sur les feuilles. Durant toute la préparation de l‟inoculum, la solution est maintenue sur un lit de glace afin d’éviter la dénaturation du virus. Les plantes ont été incubées dans des chambres « insect proof », ce qui permet d’éviter la dissémination du virus par les insectes. Les plantes inoculées ont été observées après deux (02), cinq (5), dix (10), quinze (15), et vingt (20) jours d‟incubation (JAI). La classification des accessions comme sensible, ou tolérantes a été faite en utilisant une échelle de zéro (0) à cinq (5) (Figure 3). Ainsi, les plantes présentant des symptômes situées dans les classes 0 à 2 sont considérées comme tolérantes et celles situées dans les classes 3 à 5 sont sensibles (Lebed. Harry. 2004). 0 : pas de symptômes 1 : présence de taches chlorotiques 2 : présence de taches chlorotiques et légères marbrures sur les feuilles 3 : mosaïque plus caractéristique et début de déformation des feuilles 4 : déformation et filiformisme des feuilles 5 : déformation complète des feuilles et arrêt de la croissance de la plante.

Dispositif expérimental et transplantation

La parcelle expérimentale couvre une superficie de 330 m². Un dispositif en blocs complètement randomisés avec 3 répétitions par accession et 10 plants par parcelle élémentaire a été utilisé. Chaque répétition correspond à deux lignes de 6 accessions chacune (Figure 6). La transplantation a été effectuée tout au long des gaines. La distance entre les plants était de 70 cm et sur une ligne les variétés sont distantes de 90 cm. Pour maintenir la pression parasitaire, nous avons mis en bordure des variétés sensibles. Chaque accession a été identifiée à l’aide d’une étiquette en plastique. Des brise-vents ont été installés pour protéger les plants. La transplantation a été effectuée le 17 janvier 2012. Cependant les plantes ont été inoculées 8 jours avant le repiquage pour s’assurer que toutes les plantes ont été en contact avec le ZYMV. ncision, la couleur du jeune fruit et la forme des fruits. Ceux déterminés par appréciation visuelle sont la présence de macule, la surface couverte par les macules, le port de la plante, l’attache pédonculaire et la vigueur (ou force) des plantes. Pour la vigueur des plantes une échelle allant de un à trois a été choisi; un pour les plantes de faible vigueur, deux pour celles de vigueur moyenne et trois pour les plantes de bonne vigueur.

Criblage au laboratoire

Pour la période d’incubation qui correspond au temps séparant l’inoculation des plantes et l’apparition des premiers symptômes cinq jours on été nécessaire. Ainsi à deux jours après inoculation aucun symptôme n’a été observé. A 10 jours après inoculation, les résultats du criblage des 25 accessions du lot 1 sont représentés à la figure 5. Par rapport à la réaction des plantes au virus, les résultats obtenus montrent l’existence de 3 groupes d’accessions. Ce sont 11 accessions (47, 48, 53, 54, 56, 58, 59, 60, 61, 70, et 71) tolérantes, 5 accessions (65, 66, 67, 68 et 69) sensible et 9 accessions (45, 46, 49, 50, 51, 52, 55, 57 et 62) intermédiaires (présentant à la fois des pieds sensibles et des pieds tolérants). Chez les accessions tolérantes, la sévérité des attaques de toutes les plantes est faible et est comprise entre 1 et 2. Pour les accessions sensibles, la sévérité des attaques de toutes les plantes est comprise entre les classes 3 et 5. Alors que pour les accessions intermédiaires la sévérité des attaques est faibles (entre les classes 1 et 2) pour une partie des plantes et accentuée (entre 3 et 5) chez l’autre partie (Figure 7 et Tableau 4 en annexes).

A 15 jours après inoculation, entre 10 JAI et 15 JAI on note une évolution soit positive soit négative dans la sévérité des symptômes. Ainsi on a six(6) accessions (57, 65, 66, 67, 68 et 69) sensibles, treize(13) accessions (45, 46, 47, 48, 50, 51, 52, 55, 56, 59, 60, 61 et 62) intermédiaires et cinq(5) accessions (53, 54, 58, 70 et 71) tolérantes (Figure 8 et Tableau 4 en annexes). A 20 jours après inoculation, les résultats obtenus sont identiques aux résultats du 15 JAI. Il n’y a pas d’évolution du taux d’infestation. La classification des accessions en sensibles, intermédiaires, et tolérantes devient effective. Les plantes tolérantes ont présenté les mêmes symptômes que le témoin tolérant (NL). Quant aux plantes sensibles leur symptômes ont été identiques à ceux du témoin sensible (PM). Ceci a permis de classer les accessions 57, 65, 66, 67, 68 et 69 dans les accessions sensibles, les accessions 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 55, 56, 59, 60, 61 et 62 parmi les intermédiaires et les accessions 53, 54, 58, 70 et 71 parmi les tolérantes.