ETUDE in vivo DE L’ACTIVITE ANXIOLYTIQUE DE L’EXTRAIT BSE CHEZ LA SOURIS

Evaluation de l’activité anxiolytique de l’extrait BSE sur l’activité exploratrice de la souris placée sur la planche à trous

Un dispositif décrit par BENMOUSSA A. et coll., (2007) ainsi qu’YVES COHEN. et JACQUOT CHRISTIAN., (2008) a été utilisé. Il est constitué d’une planche en bois de 36 x 36 cm (0,5 cm d’épaisseur), dans laquelle sont percés 16 trous (diamètres de 2,5 cm), équidistants les uns des autres et placée dans une enceinte à 3,5 cm des bords (Figure 3). Figure 3 : Souris placée dans le dispositif de la planche à trous dans le test d’exploration. L’extrait BSE aux doses de 50, 100 et 200 mg/kg pour les lots traités, l’eau distillée pour le lot témoin, le diazépam (Valium®) à 5mg/kg pour le lot de référence ont été administrés par voie orale. Une heure après l’administration des produits, la souris a été placée au centre de la planche à trous et laissée libre d’explorer le dispositif. Le nombre d’explorations des trous a été comptabilisé pendant 5 minutes (HELLION-IBARROLA M et coll., 2006). Les souris anxieuses ont tendance à explorer les trous noirs de la planche, pour fuir les dangers; par contre une diminution de nombre d’explorations traduit un effet anxiolytique.

Matériels et Méthodes 

Etude de l’effet antidépressif de l’extrait BSE sur le comportement de la souris soumise à une nage forcée

Afin d’étudier l’effet du BSE sur le comportement de désespoir, des souris ont été mises dans des conditions stressantes par le test de la nage forcée (DAVID D. et coll., 2007). L’extrait BSE aux doses de 50, 100 et 200 mg/kg pour les lots traités, le chlorhydrate de fluoxétine (PROZAC®) à 20mg/kg pour le lot de référence, l’eau distillée pour le lot témoin ont été administrés respectivement par voie orale. Une heure après l’administration de ces produits, les souris ont été mises dans des bocaux de 15 cm de diamètre et de 30 cm de profondeur remplis d’eau à la température de 25°C, de telle manière qu’une souris plongée à l’intérieur ne puisse pas toucher le fond du dispositif (Figure 4). Figure 4: Dispositif montrant une souris soumise à la nage forcée dans un récipient en verre contenant de l’eau à la température de 25°C. 13 Matériels et Méthodes Chaque animal est jugé immobile quand il cesse de se débattre et reste à la surface de l’eau et ne faisant que les mouvements lui permettant de maintenir la tête hors de l’eau. La durée de temps d’immobilité a été chronométrée pendant 5 minutes (PORSOLT R. et coll., 1977; XU Q. et coll., 2008). Le comportement dépressif est expliqué par l’immobilité de l’animal et interprété comme un manque de volonté à survivre; donc la diminution de cette durée de temps d’immobilité caractérise l’effet antidépressif. 

 ETUDE DES EFFETS INDESIRABLES DE L’EXTRAIT BSE

Des souris blanches des deux sexes, âgée de 6 à 8 semaines, pesant entre 20 à 30 grammes mises à jeun 12 heures avant l’expérience ont été utilisées. Les animaux ont été répartis en 5 lots de 5 souris. Les souris des trois lots ont reçu l’extrait BSE, à raison de 0 ,8 g/kg; 1,6 g/kg et 3,2 g/kg de poids vif, tandis que celles du lot témoin ont reçu de l’eau distillée par voie orale. Les produits administrés ont été dissouts dans l’eau distillée dans un volume fixé à 10ml/kg. Tous les changements de comportement ainsi que les différents signes des effets indésirables ont été observés au cours de la première journée et tous les jours pendant les 72 heures qui suivent l’administration des produits (MEISSNER H. et coll., 2006).

ANALYSE ET EXPRESSION DES RESULTATS

Tous les résultats ont été exprimés en moyenne ± e.s.m. Les moyennes des différentes expériences ont été comparées en utilisant le test « t » de Student, avec un degré de signification p ≤ 0,05 (SCHWARTZ D., 1963). Les résultats obtenus sont comparés par rapport au témoin. 15 Résultats III – RÉSULTATS :

CRIBLAGE PHYTOCHIMIQUE 

 Les résultats du criblage phytochimique sur l’extrait BSE sont résumés dans le tableau II. Ils révèlent la présence d’une forte concentration de triterpénoïdes, de sucres réducteurs (+++), d’une concentration moyenne de composés phénoliques, de flavonoïdes, de tannins catéchiques et de stérols (++), d’une faible concentration de stéroïdes lactoniques (+) et de leuco anthocyanes. Tableau II: Résultats du criblage phytochimique de l’extrait BSE : FAMILLES CHIMIQUES RÉSULTATS Triterpénoïdes +++ Sucres réducteurs +++ Composés phénoliques ++ Flavonoïdes ++ Tannins catéchiques ++ Stérols ++ Stéroïdes lactoniques + Leuco anthocyanes + Glucosides cardiotoniques – Alcaloïdes – Coumarines – Saponines – 16 Résultats 

-RESULTATS DES TESTS BIOLOGIQUES : I-EFFET DE L’EXTRAIT BSE SUR LA REACTION DE LA SOURIS : 

-Effet anxiolytique de l’extrait BSE sur le comportement d’évitement des bras ouverts du labyrinthe en croix: a) Effet anxiolytique de l’extrait BSE sur le nombre d’entrées dans les bras ouverts du labyrinthe en croix : Après l’administration par voie orale de l’extrait BSE et du valium, le nombre d’entrées dans les bras ouverts des animaux traités est supérieur à celui des animaux témoins et augmente en fonction de la dose dans les conditions expérimentales de cette étude. Durant les cinq minutes d’observation, le nombre d’entrées dans les bras ouverts des souris du lot témoin qui ont reçu de l’eau distillée est de 1,5±0,22 entrées. Aux doses de 50 à 200 mg/kg de l’extrait BSE, le nombre d’entrées dans le bras ouverts sont de 3,67±0,21 à 4,67±0,49 entrées (p < 0,05). Les souris traitées avec le diazépam (Valium®) à la dose de 5 mg/kg effectuent 6±0,26 entrées dans les bras ouverts du labyrinthe en croix (p < 0,05) (Figure 5). Figure 5: Effet anxiolytique de l’extrait BSE et du Valium ® sur le nombre d’entrées dans les bras ouverts du labyrinthe en croix comparé au témoin (Moyenne ± e.s.m ; n=6 ;*p<0,05). * * * * 0 1 2 3 4 5 6 7 Témoin BSE 50mg/kg BSE 100mg/kg BSE 200mg/kg Valium 5mg/kg Nombre d’entrées dans les bras ouverts Témoin BSE 50mg/kg BSE 100mg/kg BSE 200mg/kg Valium 5mg/kg 17 Résultats b) Effet anxiolytique de l’extrait BSE sur le temps passé dans les bras ouverts du labyrinthe en croix : L’analyse de temps passé dans le bras ouvert du dispositif révèle que les souris du lot traité avec l’extrait BSE et celui traité avec le diazépam passent plus de temps dans les bras ouverts comparé à celui du lot témoin. Durant les cinq minutes d’observation, les souris de lot témoin ayant reçu de l’eau distillée restent 30,5±2,67 secondes dans les bras ouverts, tandis qu’aux doses de 50 à 200 mg/kg, l’extrait BSE augmente le temps passé par la souris dans les bras ouverts de 56,83±1,54 à 94,67±1,63 secondes (p<0,05). Avec le diazépam (Valium®) à la dose de 5 mg/kg, les souris traitées restent pendant 107,5±1,93 secondes dans les bras ouverts (p < 0,05) (Figure 6). Figure 6: Effet anxiolytique de l’extrait BSE et du Valium ® sur le temps passé dans les bras ouverts du labyrinthe en croix comparé au témoin (Moyenne ± e.s.m ; n=6 ;*p<0,05). * * * * 0 20 40 60 80 100 120 Témoin BSE 50mg/kg BSE 100mg/kg BSE 200mg/kg Valium 5mg/kg Temps passé dans les bras ouverts (en secondes ) Témoin BSE 50mg/kg BSE 100mg/kg BSE 200mg/kg Valium 5mg/kg 18 Résultats 

Effet anxiolytique de l’extrait BSE sur le comportement d’évitement du compartiment éclairé de la boîte

 Effet anxiolytique de l’extrait BSE sur le nombre d’entrées dans le compartiment éclairé de la boîte: Après l’administration par voie orale de l’extrait BSE et de diazépam, le nombre d’entrées dans le compartiment éclairé des animaux traités est supérieur à celle des animaux témoins. Durant les cinq minutes d’observation, le nombre d’entrées dans le compartiment éclairé des souris du lot témoin qui ont reçu de l’eau distillée est de 4,5±0,43 entrées. Aux doses allant de 50 à 200 mg/kg, l’extrait BSE augmente le nombre d’entrées dans le compartiment éclairé des animaux traités de 6,67±0,37 à 7,67±0,49 entrées (p < 0,05). Avec le diazépam (Valium®) à la dose de 5 mg/kg, les souris traitées utilisées comme référence effectuent 8±0,45 entrées dans le compartiment éclairé (p < 0,05) (Figure 7). Figure 7: Effet anxiolytique de l’extrait BSE et du Valium ® sur le nombre d’entrées dans le compartiment éclairé de la boîte par rapport au témoin (Moyenne ±e.s.m; n=6 ;*p<0,05). * * * * 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Témoin BSE 50mg/kg BSE 100mg/kg BSE 200mg/kg Valium 5mg/kg Nombre d’entrées dans le compartiment éclairé Témoin BSE 50mg/kg BSE 100mg/kg BSE 200mg/kg Valium 5mg/kg 19 Résultats b) Effet anxiolytique de l’extrait BSE sur le temps passé dans le compartiment éclairé de la boîte: L’analyse de temps passé dans le compartiment éclairé révèle que durant les cinq minutes d’observation, les souris du lot témoin passent 98,2±0,60 secondes dans le compartiment éclairé, tandis que les souris traitées avec l’extrait BSE aux doses de 50 et 100 mg/kg passent de 149±0,6 à 192,8±0,70 secondes dans le compartiment éclairé (p < 0,05). Et à la dose de 200 mg/kg, le temps de passage dans le compartiment éclairé diminue à 174,2 ±0,56 secondes (p < 0,05). Avec la dose de 5 mg/kg de diazépam (Valium®), les souris restent pendant 137,5±0,99 secondes dans le compartiment éclairé (p < 0,05) (Figure 8).