Préparation de la crème de base

La crème de base utilisée a été une émulsion eau dans huile (E/H). Elle est composée de deux phases : la phase aqueuse constituée de l’eau et du bicarbonate de sodium et la phase grasse composée de l’huile de tournesol, de la cire d’abeille, de l’acide stéarique et de l’alcool stéaryle (Tableau II). Ces deux phases ont été préparées dans 2 différents récipients en inox, puis chauffées dans un bain marie à la température de 80°C. Lorsque tous les ingrédients ont été dissouts, la phase aqueuse a été versée petit à petit dans la phase grasse maintenue à la température de 80°C tout en fouettant sans arrêt à l’aide d’une batteuse électrique jusqu’à l’obtention d’une crème homogène et laissée se refroidir jusqu’à la température ambiante (DALLY L. I. et coll., 2007).

Préparation de la crème à 10 %

Pour préparer la crème à 10 % utilisée dans les tests, 5 g de l’extrait HXS ont été incorporés dans 45 g de crème de base. La crème ainsi obtenue a été homogénéisée à l’aide d’une batteuse électrique.

 Animaux d’expérimentation

Des rats mâles de souche wistar sains pesant 150 g – 250 g, âgés de 4 mois ont été utilisés. Ils ont été élevés à l’animalerie de Laboratoire de Pharmacologie Générale, de Pharmacocinétique, et de Cosmétologie (LPGPC) sous un cycle de lumière et d’obscurité 12/12 h, et à la température de 20°C. Ils ont été nourris avec de la provende LFL 1412 et ont eu de l’eau à volonté.

Création des plaies

Pour provoquer la plaie, les animaux ont été anesthésiés par inhalation avec un coton imbibé d’éther diéthylique. Ensuite, la région dorsale de ces animaux a été épilée à l’aide d’une cire à épiler tiède et d’une bande épilatoire (SHEEBA M. et coll., 2009). Puis, le résidu de cire sur la peau a été enlevé avec de l’huile post épilatoire, et la partie épilée a été nettoyée à l’aide d’un coton imbibé d’eau. Deux plaies circulaires de 10 mm de diamètre ont été créées de part et d’autre de la ligne médiane de la colonne vertébrale à l’aide d’un dispositif comportant une lame tranchante de 1cm de diamètre (SHAILAJAN S. et coll., 2011).

Traitement des plaies

Après la création des plaies, les animaux ont été répartis en 2 lots : 1 lot témoin et 1 lot traité avec l’extrait. Les plaies des animaux du lot témoin ont été traitées avec 10 mg de crème de base 1 fois par jour jusqu’à la fermeture de la plaie, tandis que celles des animaux du 2ème lot ont été traitées avec 10 mg de la crème contenant 10 % de l’extrait HXS 1 fois par jour jusqu’à la fermeture de la plaie. Les crèmes ont été appliquées par un doux massage circulaire à la même heure.
Avant l’application des crèmes tous les jours, la plaie a été nettoyée et ensuite photographiée. La croûte sur la surface de la plaie a été ramollie en appliquant un coton imbibé d’eau pendant quelques minutes, puis elle a été enlevée à l’aide d’une pince. La surface de la plaie a ensuite été nettoyée à l’aide d’une coton tige imbibée d’eau, enfin un papier buvard a été appliqué sur la surface de la plaie pour la sécher.

Etude de l’activité cicatrisante de l’extrait HXS

Pour étudier l’effet cicatrisant de l’extrait HXS, l’évolution de la plaie a été observée tous les jours sur chaque phase de la cicatrisation. Vingt-quatre heure après cette création des plaies, elles ont été nettoyées et puis photographiées.

Etude de l’effet de l’extrait HXS sur la phase inflammatoire

La phase inflammatoire consiste à nettoyer la plaie caractérisée par la rougeur et l’œdème sur la berge des plaies ainsi que l’exsudation sur la surface des plaies (DEMARCHEZ M., 2014). Pour étudier cette phase, la présence de ces signes d’inflammations a été observée et notée chez les deux lots tous les jours jusqu’à leur disparition. Et la durée de cette phase a été notée. b. Etude de l’effet de l’extrait HXS sur la phase proliférative La phase proliférative est caractérisée par l’apparition des granulations au niveau de la surface des plaies (DEMARCHEZ M., 2015). Avant de les photographier, les plaies ont été nettoyées, et leur surface a été observée pour voir les granulations. Le temps d’apparition des granulations au niveau de la surface des plaies a été enregistré.

Etude de l’effet de l’extrait sur la phase d’épithélialisation

La phase de réépithélialisation est caractérisée par la présence d’une membrane rose qui couvre la surface de la plaie lors que la croûte tombe (GUYADEC T., 2006). Après le nettoyage de la plaie, elle a été photographiée, puis la présence de cette membrane a été notée.

Etude de l’effet de l’extrait HXS sur la vitesse de cicatrisation

Afin de calculer la vitesse de cicatrisation, la surface des plaies a été mesurée tous les jours par planimétrie directe juste après la création de la plaie jusqu’à la fermeture complète, Cette méthode consiste à tracer le contour de la berge de la plaie à l’aide d’un crayon à pointe fine sur un papier millimétré transparent placé sur la plaie (BENSEGUEN A. et coll., 2007). Le temps de la fermeture de plaie traité avec l’extrait a été observé et comparé à celui du lot témoin.

EXPRESSION ET ANALYSE DES DONNEES

Les résultats ont été exprimés sous forme de moyenne ± écart-type réduit, et les moyennes obtenues chez les rats traités avec la crème contenant d’extrait HXS à 10 % ont été comparées avec celles du lot témoin, en utilisant le test « t » de STUDENT avec un degré de signification P < 0,05.