ETUDE DE L’ACTIVITE ANTI-DARRHEIQUE DE L’EXTRAIT IS-015 CHEZ LE COBAYE

ETUDE DE L’ACTIVITE ANTI-DARRHEIQUE DE
L’EXTRAIT IS-015 CHEZ LE COBAYE

A l’échelle mondiale, 400 millions de cas de diarrhée sont recensés par jour (DOSSO M. et coll., 1998). La diarrhée figure parmi les causes de mortalité les plus importantes chez les enfants (HUBER-GIESKE T. et BICHARD P., 2013), elle constitue la deuxième cause de décès des enfants de moins de 5 ans après la pneumonie (FARTHING M., 2012). Elle est liée aux mauvaises conditions d’hygiène locale, à la malnutrition et aux moyens sanitaires limités, et de ce fait elle touche en particulier les régions pauvres (MINSAN., 2012). Dans les pays industrialisés, la mortalité est faible en raison de meilleures conditions d’hygiène et de vie (EMILY W., 2012). A Madagascar, la diarrhée reste courante aussi bien dans les zones urbaines que rurales. Selon l’Annuaire du Ministère de la Santé et du Planning Familial en 2003, la diarrhée est la troisième cause de consultation au niveau des centres de santé, et la troisième cause principale de mortalité infantile après la pneumonie et le paludisme. La diarrhée est caractérisée par l’émission de selles molles, voire liquides, en quantité anormale avec une fréquence élevée (RANDREMANANA R., 2012). Elle est due au déséquilibre entre l’absorption et la sécrétion intestinale d’eau et d’électrolytes (CEZARD J.P. et coll., 2002). Environ 9 L de fluide par jour transitent dans l’intestin. Ce fluide est constitué des sucs digestifs et d’eau apportée par la nourriture. A l’état normal, la majorité de ce fluide est absorbée par l’organisme au niveau de l’intestin grêle, le colon en absorbe 1 à 1,5 L et les selles ne contiennent plus qu’environ 100 ml d’eau par jour (ENGRAND N., 2010). L’eau et les électrolytes sont absorbés au niveau de l’épithélium intestinal par le cycle entéro-systémique de l’eau. La réabsorption de l’eau est secondaire à la réabsorption du sodium, elle-même secondaire à la réabsorption de glucose dans la lumière intestinale (DESJEUX J.F., 1985). Selon sa durée, la diarrhée peut être classée en diarrhée aigüe et diarrhée chronique. La diarrhée aigüe est caractérisée par un début brutal et une durée limitée, tandis que la diarrhée chronique s’étend sur une période excédant les trois semaines (KENNE FOPA O., 2005). La cause la plus fréquente de la diarrhée aiguë est une infection intestinale. Des germes invasives comme Shigella, Salmonella pénètrent dans la paroi intestinale et provoquent la destruction des microvillosités. Ils modifient le processus de transport épithélial et perturbent l’absorption de l’eau et d’électrolyte (BELAICHE J., 2000). Les germes entérotoxinogènes se fixent sur la paroi intestinale et produisent des toxines qui endommagent les cellules épithéliales et stimulent la sécrétion d’eau et d’électrolytes, 1 Introduction entrainant ainsi une accumulation d’eau dans la lumière intestinale. Les rotavirus, Vibrio cholerae, Escherichia coli entérotoxinogènes font partie de ce groupe. (AUBRY P. 2013 ; CATHERINE D., 1997). 

Préparation de l’extrait 

Pour préparer l’extrait IS-015, des feuilles d’une plante utilisée par la communauté d’Ambodiala, dans la région d’Analamanga ont été récoltées dans les champs de culture d’Ambodiala, le mois de Novembre 2014. Elles ont été séchées à l’ombre à la température ambiante, dans une salle aérée pendant un mois. Après séchage, les feuilles ont été broyées à l’aide d’un broyeur à marteau électrique, et 500 grammes de la poudre ainsi obtenue ont été macérés dans un mélange d’EtOH-H2O dans une proportion (60:40) à la température ambiante. Le macérât a été filtré à l’aide d’un papier Whatman, et le filtrat a ensuite été évaporé à sec, sous vide à l’aide d’un Rotavapor (Büchi ®) à la température de 80°C. L’extrait hydro alcoolique obtenu après l’évaporation a été codé IS-015, puis pesé pour calculer le rendement de l’extraction selon la formule: Rendement = Poids de l′extrait poids de la poudre x 100 

Criblage phytochimique 

Pour déterminer les familles chimiques présentes dans l’extrait IS-015, un criblage phytochimique a été effectué selon la méthode de FONG H.H.S et ses collaborateurs (1977). Des réactifs spécifiques pour chaque famille chimique ont été utilisés, la présence de la famille chimique correspondante provoque une réaction de précipitation ou de changement de couleur de l’extrait (Tableau I). Les signes suivants ont été utilisés pour exprimer la teneur des familles chimiques présentes dans l’extrait: (±) : présence en très faible quantité (+) : présence en faible quantité (++) : Présence en moyenne quantité (+++) : Présence en forte quantité

Table des matières

LISTE DES TABLEAUX
LISTE DES ABREVIATIONS
INTRODUCTION
MATERIELS ET METHODES
I. PARTIE CHIMIQUE
1. Préparation de l’extrait
2. Criblage phytochimique
II. PARTIE PHARMACOLOGIQUE
1. Étude de l’effet de l’extrait IS-015 sur la diarrhée sécrétoire
2. Étude de l’effet de l’extrait IS-015 sur la diarrhée motrice
a. Étude de l’effet relaxant de l’extrait IS-015
b. Étude de l’effet de l’extrait IS-015 vis-à-vis de l’acétylcholine
III. EXPRESSION ET ANALYSES DES RÉSULTATS 8
RESULTATS
I. PARTIE CHIMIQUE
II. PARTIE PHARMACOLOGIQUE
1. Effet de l’extrait IS-015 sur la diarrhée sécrétoire
2. Effet de l’extrait IS-015 sur la diarrhée motrice
3. Effet de l’extrait IS-015 vis-à-vis de l’acétylcholine
DISCUSSION
CONCLUSION
BIBLIOGRAPHIES

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