Détermination de la structure du composé MG442-229-3

Détermination de la structure du composé MG442-229-3

La fraction MG442-22 a été traitée successivement par colonne de Sephadex LH-20 suivie d’une colonne C-18 pour donner 9 sous fractions. La sous fraction MG442-22-9 a été purifié par chromathographie sur colonne de silice en élution isocratique Hexane/AcOEt (60 : 40) et a donnée le produit MG442-229-3 (51,92 mg).. Spectre du proton RMN 1H Le spectre RMN 1H (Figure 77) du produit MG442-229-3 montre la présence de 2 pyrones. Le signal à 6.91 ppm (m) intégrant 2 protons oléfiniques dans un cycle et le signal à 6.04 ppm (d, J = 9.7 Hz) intégrant également 2 protons oléfiniques dans un cycle sont des protons caractéristiques de pyrones (H-4, H-3). Les 4 protons oléfiniques appartiennent à 2 cycles pyroniques. Le multiplet à 5.75 ppm intégrant pour un proton et le doublet dédoublé à 5.49 ppm (dd, J = 15.2 Hz, J = 7.2 Hz, H-2’) intégrant pour un proton sont des signaux de protons oléfiniques dans une chaîne. Les déplacements chimiques à 4.68 ppm (m), 4.58 ppm (m) et à 4.38 ppm (dd, J = 13.5 Hz, J = 6.7 Hz) et 3.88 ppm (m) sont attribuables aux protons portés par des carbones oxygénés. Le multiplet à δ 1.30 ppm sont attribuables à des chaînes CH2. Enfin le signal d’un groupement méthyle formant un triplet à 0.90 ppm (t, J = 6.7 Hz) montre un CH3 à côté d’un -CH2 et le multiplet à 2.02 ppm correspond à un -CH3 à côté d’un carbone oxygéné.

Spectres du carbone RMN 13C

Le spectre RMN du carbone du produit MG442-229-3 (Figure 78) confirme aussi la présence de deux entités pyrones caractérisées par les carbonyles à 164.1 ppm et à 164.0 ppm, les oléfiniques à 145.2 ppm et à 145.1 ppm et aussi à 121.4 ppm et à 121.3 ppm. Le spectre RMN 13C du produit MG442-229-3 présente des pics doubles à (164.1, 164.0 ppm), (145.2, 145.1 ppm) et (121.4, 121.3 ppm) correspondant à des déplacements chimiques des carbones de 2 pyrones. La présence des ces doublets témoigne que le produit MG442-229-3 est constitué de mélange des pyrones.Les corrélations hétéronucléaires HSQC donnent des informations que les protons à 6.90 ppm et à 6.04 ppm caractéristiques du cycle pyrone sont respectivement portés par les carbones à 145.2 ppm et à 121.3 ppmL’hypothèse de structures de deux composés majoritaires dans le produit MG442-229-3 ont été confirmée par les corrélations observées sur le spectre COSY (Figure 80) et le spectre HMBC.

Les analyses en RMN du composé MG442-229-3 ont montré que ce produit est constitué d’un mélange de deux molécules de profil pyrone. Leurs structures ont été identifiées par examen des spectres de RMN combinés aux données de la littérature comme étant le Desacety lumuravumbolide [Kumar et al. 2013 ; Sabitha et al. 2012] et le Gamahonolide A [Sabitha et al. 2014 ; Koshino et al. 1992]Desacetyl-umuravumbolide a été isolé dans Tedradenia riparia, une plante d’Afrique du Sud et de Rwanda, par Van Puyvelde et al. en 1979. En 2012 Sabitha et al. puis en 2013 Kumar et al. ont réalisé les travaux de synthèse du desacetyl-umuravumbolide qui est un produit ayant des propriétés antitumorale et cytotoxique. Les données de la littérature que nous avons trouvées sur Gamahonolide A sont des données de sa synthèse. On peut avancer que Gamahonolide A a été isolée naturellement pour la première fois dans une plante. Relevé des spectres RMN de Desacetyl-umuravumbolide (pyrone 5) RMN 1H (CDCl3, 400 MHz) : δ ppm 6.91 (1H, m, H-4), 6.04 (1H, d, 3J3-4 = 9.7 Hz, H-3), 5.80 – 5.69 (1H, m, H-1’), 5.49 (1H, dd, 3J2’-1’ = 15.2 Hz, 3J2’-3’ = 7.2 Hz, H-2’), 4.73 – 4.64 (1H, m, H-3’), 4.38 (1H, dd, 3J6-5 = 13.5 Hz, J6-1’ = 6.7 Hz, H-6), 2.43 (2H, m, H-5), 1.54 – 1.30 (6H, m, H-4’, H-5’, H-6’), 0.90 (3H, t, 3J7’-6’ = 6.7 Hz, H-7’). RMN 13C (CDCl3, 101 MHz) : δ ppm 164.0 (C-2), 145.1 (CH, C-4), 133.6 (CH, C-1’), 131.6 (CH, C-2’), 121.3 (CH, C-3), 75.9 (CH, C-3’), 69.8 (CH, C-6), 31.9 (CH2, C-5’), 29.3 (CH2, C-5), 27.2 (CH2, C-4’), 22.6 (CH2, C-6’), 14.1 (CH3, C-7’).

Relevé des spectres RMN de Gamahonolide A (pyrone 6) RMN 1H (CDCl3, 400 MHz) : δ ppm 6.91 (1H, m, H-4), 6.04 (1H, d, 3J3-4 = 9.7 Hz, H-3), 4.62 – 4.53 (1H, m, H-6), 3.88 (1H, m, H-6’), 2.47 – 2.40 (2H, m, H-5), 2.18 – 1.76 (4H, m, H-1’, H-7’), 1.30 (8H, m, H-2’, H-3’, H-4’, H-5’). RMN 13C (CDCl3, 101MHz) : δ ppm 164.1 (C-2), 145.2 (CH, C-4), 121.4 (CH, C-3), 76.9 (CH, C-6), 69.2 (CH, C-6’), 41.9 (CH2, C-5’), 32.1 (CH2, C-1’), 29.7 (CH2, C-5), 29.5 (CH2, C-3’), 27.2 (CH2, C-4’), 27.1 (CH2, C-2’), 25.4 (CH3, C-7’).

Détermination de la structure du composé MG442-221-3

La fraction MG442-22 a été traitée successivement sur une colonne Sephadex LH-20 puis sur colonne C-18. Le produit MG442-221 issu des passages à travers ces 2 colonnes a été purifié par CCM préparative (éluant : Hexane/AcOEt, 50/50) et a donné le produit MG442-221-3 sous forme de poudre jaune pâle (5,82 mg). Spectre de masse ESI-MS Les spectres de masse ESI-MS (Figure 83) du produit obtenu présentent en mode négative un pic à m/z = 353 attribuable à l’ion quasi-moléculaire [M-H]- et en mode positive un pic à m/z=377 correspondant à l’ion quasi-moléculaire [M+Na]+ suggérant une masse moléculaire M= 354 g.