ACTIVITE ANTIOXYDANTE DES GRAINES ET ECORCES DE TRONC DE AZADIRACHTA INDICA

ACTIVITE ANTIOXYDANTE DES GRAINES ET
ECORCES DE TRONC DE AZADIRACHTA INDICA

RAPPELS SUR LE STRESS OXYDATIF ET LES ANTIOXYDANTS 

Les radicaux libres et le stress oxydatif

Les radicaux libres Un radical libre est une espèce chimique (atome ou molécule) qui possède un électron célibataire (ou électron non apparié) sur sa couche externe (Toussaint, 2008). Leur principal danger vient des dommages qu’ils peuvent provoquer lorsqu’ils réagissent avec des composants cellulaires importants comme l’ADN ou la membrane cellulaire, avec un risque de multiplication anormale des cellules, entrainant un dysfonctionnement ou une mort cellulaire, un cancer. Les radicaux libres nocifs sont produits dans l’organisme au cours du métabolisme normal, mais plus encore en cas d’exposition à diverses agressions de l’environnement (agents infectieux, pollution, UV, fumée de cigarettes, rayonnement) (Tanguy et al., 2009). Les radicaux libres sont très instables et très réactifs. Ils sont produits d’une manière continue au sein de l’organisme, dans le cadre de nombreux processus biologiques. Par exemple, lors de la respiration cellulaire, l’oxygène moléculaire se transforme en diverses substanc es ox ygén ées , communément app elées radicaux libres de l’oxygène ou espèces réactives oxygénées (Reactive Oxygen Species : ROS). Dans certaines situations, cette production augmente fortement, entraînant un stress oxydatif (Gutteridge, 1993). 16 II.1.2 Le stress oxydatif Le stress oxydatif se définit comme étant un déséquilibre profond de la balance entre les pro oxydants et les antioxydants (Pincemail et al., 1999) en faveur des premiers (pro-oxydants) et impliquant la production d’espèces réactives de l’oxygènes (Pelletier et al., 2004). La formation incontrôlée d’espèces réactives de l’oxygène comme l’anion superoxyde, le peroxyde d’hydrogène ou encore le radical hydroxyle aura la conséquence souvent lourde pour l’organisme. Toutefois, la formation d’espèces réactives n’est pas toujours synonyme de toxicité. En effet, certains radicaux libres sont des intermédiaires de processus physiologiques normaux. Les radicaux libres participent au fonctionnement de certaines enzymes, à la réponse immunitaire, à la destruction par apoptose des cellules tumorales (Favier, 2003). Ce n’est que lorsque les systèmes de défense sont dépassés et ne suffisent plus à neutraliser la surproduction de ces espèces que la toxicité apparaît. Le stress oxydatif apparaît lorsque les systèmes de défense sont dépassés et ne suffisent plus à neutraliser la surproduction de ces espèces ou par suite de l’inhibition des systèmes antioxydants. Parmi les espèces réactives de l’oxygène, le radical hydroxyle, présenté comme le plus toxique malgré sa faible diffusion, peut attaquer tous les types de constituants cellulaires et engendrer diverses altérations (dégradation protéique, inactivation enzymatique, lipoperoxydation, adduits à l’ADN, etc.). Il résulte de la fission O-O du peroxyde d’hydrogène (Pelletier et al., 2004). Il peut être produit par les réactions de FENTON et de HABER-WEISS : 17 O2 .- + Fe(III) O2 + Fe(II) Fe(II) +H2O2 Fe(III) + OH- + OH. (FENTON) O2 .- + H2O2 OH- + OH. + O2 (HABER-WEISS) (Pelletier et al, 2004)

matériel végétal

Le matériel végétal est constitué par les graines et les écorces de tronc de Azadirachta indica et de Khaya senegalensis appartenant tous à la famille des Méliacées. Les écorces et les graines de Azadirachta indica ont été récoltées à Thiès à la Cité Ibrahima SARR Ex Ballabey tandis que les graines de Khaya senegalensis ont été un don de la part du PRONASEF (Programme national de semences forestières) Les plantes ont été identifiées au Laboratoire de Pharmacognosie et Botanique de la Faculté de Médecine, de Pharmacie et d’Odontologie (FMPO) de l’Université Cheikh Anta Diop de Dakar (UCAD) durant le mois de Juillet 2015. Les drogues ont été séchées à l’étuve à 60°C. 

matériel utilisé pour l’extraction et le screening chimique 

Évaporateur rotatif Stuart® RE300DB ;  Plaque chauffante Gerhardt ;  Centrifugeuse Alc® centrifugette 4206 ;  Micropipette Digital 200-1000 µl (labosystems) ;  Spectrophotomètre Biosystems BTS-350 ;  Tubes à essai courts 5 ml ;  Bécher 500 ml approximativement ;  Erlenmeyer ;  Eprouvettes ;  Ballon ;

Table des matières

INTRODUCTION
PREMIERE PARTIE :RAPPELS BIBLIOGRAPHIQUES
CHAPITRE I : PRESENTATION DE Khaya senegalensis (Desr.) A. Juss ET DE Azadirachta indica A. Juss
I.1.Synonymes et autres appellations
I.2.Etudes taxonomiques
I.3.Etudes botaniques
I.4.Habitat et répartition géographique
I.5.Chimie
I.6.Etude éthnopharmacologique
CHAPITRE II : RAPPELS SUR LE STRESS OXYDATIF ET LES ANTIOXYDANTS
II.1 Les radicaux libres et le stress oxydatif
II.1.1 Les radicaux libres
II.1.2 Le stress oxydatif
Chapitre I : MATERIEL ET METHODES
I-1 : matériel et réactifs
I-1-1 : matériel végétal
I-1-2 : matériels utilisés pour l’extraction et le screening chimique
I-1-3 : Principaux réactifs utilisés
I-2 : Méthodes d’étude
I-2-1 : Préparation des extraits
I-2-2 : Caractérisations
I-2-2-1 Recherche des alcaloïdes
I-2-2-2 Recherche des hétérosides cardiotoniques
I-2-2-3 Recherche des tanins
I-2-2-4 Recherche des hétérosides flavoniques
I-2-2-5 Recherche des saponosides
I-2-3 Activité antioxydante
I-2-3-1 La méthode de FRAP
I-2-3-2 La méthode au NO
I-2-3-3 La méthode au DPPH
I-3 Expression des résultats
I-3-1 Méthode de FRAP
I-3-2 Méthode au NO
I-3-3 Test du piégeage du DPPH
DEUXIEME PARTIE
CHAPITRE 2 : RESULTATS ET DISCUSSION
II.1 Résultats
II.1.1 Extraction
II.1.2 Caractérisation
II.1.3 Activité antioxydante
II.1.3.1 Méthode de FRAP
II.1.3.1.1 Extrait aqueux des écorces du tronc de Azadirachta indica
II.1.3.1.2 Extrait aqueux des écorces du tronc de Khaya senegalensis
II.1.3.1.3 Extrait aqueux des graines de Azadirachta indic
II.1.3.1.4 Extrait aqueux des graines de Khaya senegalensis
II-1.3.1.5 Acide ascorbique
II.1.3.2 Méthode au NO
II.1.3.2.1 Extrait aqueux des écorces du tronc de Azadirachta indica
II.1.3.2.2 Extrait aqueux des écorces du tronc de Khaya senegalensis
II.1.3.2.3 Extrait aqueux des graines de Azadirachta indica
II.1.3.2.4 Extrait aqueux des graines de Khaya senegalensis
II.1.3.2.5 Acide ascorbique
II.1.3.3 Test du piégeage du DPPH
II.1.3.3.1 Extrait aqueux des écorces du tronc de Azadirachta indica
II.1.3.3.2 Extrait aqueux des écorces du tronc de Khaya senegalensis
II.1.3.3.3 Extrait aqueux des graines de Azadirachta indica
II.1.3.3.4 Extrait aqueux des graines de Khaya senegalensis
II-1-3-3-5 Action de l’acide ascorbique sur le DPPH
II.2 DISCUSSION

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