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1. Principe Fondamental du Dosage Enzymatique
L’objectif d’un dosage enzymatique est de mesurer la quantité d’enzyme présente dans un échantillon en évaluant son activité. L’activité enzymatique se réfère à la vitesse à laquelle une enzyme catalyse une réaction chimique. La mesure de cette activité repose généralement sur la variation de la concentration du substrat ou du produit de la réaction.
2. Sélection du Substrat
Pour mesurer l’activité d’une enzyme, il est essentiel de choisir un substrat spécifique sur lequel l’enzyme peut agir. Le substrat doit être choisi de manière à ce que la réaction catalysée soit facile à suivre. En fonction de l’enzyme, il existe différents types de substrats, et la réaction peut être suivie par la mesure de la disparition du substrat ou de la formation du produit.
3. Méthodes de Mesure
Il existe plusieurs méthodes pour quantifier l’activité enzymatique :
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Mesure de la variation de la concentration du substrat : L’enzyme convertit le substrat en produit, et la diminution de la concentration du substrat est mesurée.
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Mesure de la concentration du produit : On mesure la concentration du produit formé, ce qui permet d’évaluer l’activité enzymatique.
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Mesure de la vitesse initiale : La vitesse de réaction au début de l’enzyme peut être mesurée, avant que l’équilibre ne soit atteint, pour obtenir une estimation de l’activité enzymatique.