Dosage des ions

Dosage des ions

Les dosages des ions (anions et cations) dans les milieux de culture sont effectués par chromatographie liquide haute performance (CLHP). Cette méthode est utilisée pour quantifier le magnésium, le calcium, le nitrate et le nitrite. Le sodium, le potassium, le chlorure, le sulfate et le phosphate sont détectés mais non quantifiés. L’appareillage utilisé est une chaine HPLC ICS-3000 de chez DIONEX. Les échantillons à analyser sont impérativement filtrés sur un filtre PTFE avec un seuil de coupure de 0,45μm. Avant analyse, les échantillons sont conditionnés dans des flacons en verre munis de bouchons avec septum téflon, et conservés à 4°C. Des dilutions sont faites juste avant analyse pour se situer dans la gamme d’étalonnage des standards. Les solutions standards (pour l’établissement d’une gamme étalon) sont également conditionnées dans des flacons en verre munis de bouchons avec septum téflon, et conservés à -20°C.  L’HPLC ionique est équipée d’un passeur d’échantillon, d’une pompe, d’une enceinte thermostatée, d’un suppresseur et d’une détection par conductimétrie. L’HPLC est équipée d’un générateur d’éluent et d’un suppresseur électrique. L’utilisation d’un générateur d’éluent et d’un suppresseur électrique évite de préparer les diverses solutions (éluant, solution de lavage…), Les échantillons à analyser sont impérativement filtrés sur un filtre PTFE avec un seuil de coupure de 0,45μm. Avant analyse, les échantillons sont conditionnés dans des flacons en verre munis de bouchons avec septum téflon, et conservés à 4°C. Des dilutions sont faites juste avant analyse pour se situer dans la gamme d’étalonnage des standards. Les solutions standards (pour l’établissement d’une gamme étalon) sont également conditionnées dans des flacons en verre munis de bouchons avec septum téflon, et conservés à -20°C.

La Figure 28 montre la réponse de la biomasse. La quantité de biomasse mise en œuvre est de 16,2 mg. On obtient une réponse TOC de 40,62 (% poids de l’échantillon sec) et une réponse MinC nulle (% poids de l’échantillon). Le carbone présent dans la biomasse donne une réponse essentiellement dans les fractions S1+S2 de pyrolyse (44% p/p) et S4CO2tée, d’un suppresseur et d’une détection par conductimétrie. L’HPLC est équipée d’un générateur d’éluent et d’un suppresseur électrique. L’utilisation d’un générateur d’éluent et d’un suppresseur électrique évite de préparer les diverses solutions (éluant, solution de lavage…), Les échantillons à analyser sont impérativement filtrés sur un filtre PTFE avec un seuil de coupure de 0,45μm. Avant analyse, les échantillons sont conditionnés dans des flacons en verre munis de bouchons avec septum téflon, et conservés à 4°C. Des dilutions sont faites juste avant analyse pour se situer dan charge minérale (CaCO3)). La réponse de la biomasse est calculée en prenant en compte les fractions suivantes : S1, S2, S3CO, S3’CO, S3CO2, S4CO, et S4CO2. Les valeurs des 2 fractions S1 et de S2 sont exprimées (par le logiciel du RE) en mg HC/g d’échantillon introduit dans la nacelle. Ces valeurs sont transformées en μmol de carbone pour la quantité d’échantillon analysé (en mg). Le calcul fait appel à la teneur en carbone (83%) du standard S160000. De même, les valeurs des 5 fractions S3CO, S3’CO, S3CO2, S4CO, et S4CO2, qui sont exprimées en mg CO ou CO2/g d’échantillon introduit dans la nacelle (par le logiciel du RE), sont transformées en μmol de carbone pour la quantité d’échantillon analysé (en mg). On additionne la quantité de carbone obtenue dans ces 7 fractions (en μmol de carbone). On trace une relation mg de biomasse sèche déposée dans la nacelle (abscisse)/ μmol de C (en ordonnée).